動(dòng)物育種已進(jìn)入基因組育種時(shí)代。
基因組選擇的優(yōu)勢:
1)無需性能測定,羔羊出生時(shí)測基因成本低,可以實(shí)現(xiàn)早選和縮短育種周期。
2)不受環(huán)境影響,選種效率和準(zhǔn)確性高,可快速準(zhǔn)確選出好基因。
3)實(shí)現(xiàn)對測定難度大的性狀、活體無法度量的性狀和只有一個(gè)性別表現(xiàn)性狀的準(zhǔn)確選擇。
可以實(shí)現(xiàn)活體選肉質(zhì),選擇好公畜提高母畜表現(xiàn)的性狀。
我國羊基因組選擇亟需突破的關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié):
1)大規(guī)?;蚪M選擇參考群,如澳大利亞、新西蘭參考群規(guī)模已突破萬級。
2)低成本高效率的基因分型技術(shù)。固相芯片由國外壟斷,液相芯片技術(shù)成本低、效率高,且技術(shù)完全自主。
3)配套遺傳評估技術(shù),羊種業(yè)發(fā)達(dá)國家已制定適于本國的性能指數(shù)。
第一個(gè)萬羊基因組計(jì)劃為湖羊基因組選擇,參考群10000只(公羊3000只,母羊7000只),包含所有的經(jīng)濟(jì)性狀,基因組序列全覆蓋。第二個(gè)萬羊基因組計(jì)劃為混合品種羊基因組選擇,參考群為12000只,包括引進(jìn)品種5000只,小尾寒羊1500只,灘羊1500只,毛用羊2000只,其他品種2000只,僅包含主要經(jīng)濟(jì)性狀,基因組序列全覆蓋。
整體分為三步,即摸家底、建標(biāo)尺和深挖掘。
主要分為兩步,第一步實(shí)現(xiàn)千羊計(jì)劃,第二步實(shí)現(xiàn)萬羊計(jì)劃。
4.1 建立三大平臺(tái)
4.2 第一個(gè)萬羊基因組計(jì)劃(湖羊)
4.2.1湖羊公羊基因組計(jì)劃
該計(jì)劃的目標(biāo)是2022年底實(shí)現(xiàn)湖羊公羊基因組選擇參考群達(dá)3000只以上。目前已有規(guī)模2710只,羊群來自10個(gè)湖羊種羊場,測定性能包括生長性能(109個(gè)指標(biāo))、胴體性狀(10個(gè)指標(biāo))、機(jī)體組成(72個(gè)指標(biāo))、肌肉品質(zhì)(18個(gè)指標(biāo))及繁殖性能(20個(gè)指標(biāo)),總計(jì)229個(gè)指標(biāo)。已收集59.62萬條表型數(shù)據(jù)。
性能測定人員包括全職老師12人,市縣技術(shù)人員5人,性能測定中心人員2人,博士生9人,碩士生106人,累計(jì)128人參加性能測定??傆?jì)達(dá)552人次,38560人時(shí)。
4.2.2湖羊母羊基因組計(jì)劃
該計(jì)劃的目標(biāo)是2022年底實(shí)現(xiàn)湖羊公羊基因組選擇參考群達(dá)7000只以上。目前已有規(guī)模5280只,羊群來自4個(gè)湖羊種羊場,測定性能包括生長性能(109個(gè)指標(biāo))、產(chǎn)羔數(shù)、產(chǎn)活羔數(shù)、妊娠期、產(chǎn)羔均勻度、乳頭數(shù)、乳房周徑及羔羊早期發(fā)育(初生重、3日齡重、7日齡重、15日齡重及30日齡重)。已收集5.81萬條表型數(shù)據(jù)。
4.3 蘭大“羊芯1號”(LZU-SHEEP-45K)湖羊高性能基因組育種芯片
4.3.1簡介
千羊計(jì)劃已獲得48617Gb原始數(shù)據(jù),已繪制出越高密度、越高分辨率的湖羊基因組遺傳變異圖譜。
根據(jù)這些數(shù)據(jù)設(shè)計(jì)的“羊芯1號”(LZU-SHEEP-45K)湖羊高性能基因組育種芯片,芯片位點(diǎn)設(shè)計(jì)完成,已進(jìn)入測試階段除核心芯片外,還設(shè)計(jì)出滿足不同需求的衍生芯片,如飼料效率、生長速度、胴體和肌肉品質(zhì)及品種鑒定芯片。
蘭大“羊芯1號”(LZU-SHEEP-45K)五大特點(diǎn):
1)100%技術(shù)自主。羊芯1號采用液相芯片技術(shù)體系,沒起定量,不受“卡脖子”限制。
2)基于“千級”規(guī)模參考群體設(shè)計(jì)。國內(nèi)首款基于羊大規(guī)?;蚪M選擇參考群設(shè)計(jì),擁有完全配套的基因組選擇參考群和基因組遺傳評估技術(shù)體系。
3)基因組序列全覆蓋?;诔^2000只綿羊的海量基因組重測序數(shù)據(jù),鑒別出的4000萬個(gè)高質(zhì)量遺傳變異位點(diǎn)甄選出基因組均勻公布的45080個(gè)SNPs。
4)包含所有的重要經(jīng)濟(jì)性狀。如飼料轉(zhuǎn)化率、生長、胴體、肉品質(zhì)、繁殖等225個(gè)重要經(jīng)濟(jì)性狀指標(biāo)。
5)靈活度高。羊芯1號在滿足45k標(biāo)記區(qū)段檢測的同時(shí),衍生出25K和10K的系列芯片,適用于不同應(yīng)用場景。
4.3.2技術(shù)參數(shù)
芯片擁有1Mb窗口的SNP數(shù)量,標(biāo)記間距的概率平均密度為62.327Kb,最小等位基因頻率分布0.3951。SNP集合的LD值從0.80衰減至0.03,平均LD為0.05(2Mb范圍)。嵌入了3177個(gè)自主鑒定的功能性關(guān)聯(lián)位點(diǎn)(遺傳變異解釋度超過10%)。
4.3.3配套遺傳評估技術(shù)
包括3個(gè)不同應(yīng)用場景的性能指數(shù),分別為湖羊性能指數(shù)(HSI,基礎(chǔ)版)、湖羊性能指數(shù)(HSI+,升級版)及湖羊基因組選擇性能指數(shù)(GHSI)。
4.4 第二個(gè)萬羊基因組計(jì)劃(混合品種)
2023年底,完成收集約2000只國內(nèi)外綿羊品種(84個(gè))基因組數(shù)據(jù)。已完成1969只,84個(gè)品種。數(shù)據(jù)來源包括團(tuán)隊(duì)自測54個(gè)中國地方品種,13個(gè)引進(jìn)品種及NCBI公共數(shù)據(jù)庫,測序深度約10X,已得到的基因組數(shù)據(jù)量為49.5T。
2028年底,完成引進(jìn)品種5000只、小尾寒羊1500只、灘羊1500只、毛用羊2000只的基因組數(shù)據(jù)。已完成杜泊羊83只、灘羊113只,羊群來源于2個(gè)國家核心育種場。測定性狀包括生長性狀(109個(gè)指標(biāo))、機(jī)體組成(72個(gè)指標(biāo))、胴體性狀(10個(gè)指標(biāo))、肌肉品質(zhì)(18個(gè)指標(biāo))、公羊繁殖性狀(20個(gè)指標(biāo)),總計(jì)229個(gè)指標(biāo)。已獲得4.49萬條表型數(shù)據(jù),2.94T基因組數(shù)據(jù)。
基于以上國內(nèi)外品種基因數(shù)據(jù)設(shè)計(jì)出湖羊DNA條形碼。
國內(nèi)外綿羊品種遺傳結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn):
1)野羊與家綿羊明顯分離,野羊、中國地方綿羊品種、非洲地方綿羊品種、引進(jìn)品種分別各聚一支。
2)與野羊相比,基因組受選擇強(qiáng)度依次為引進(jìn)品種、中國地方品種、非洲地方品種。
3)野羊與家綿羊存在明顯的基因交流。
4)中國地方綿羊品種明顯分為蒙古系、藏系和哈系。
5)家綿羊在馴化過程中,免疫和神經(jīng)視覺能力相關(guān)基因受到了強(qiáng)烈選擇。
6)引進(jìn)品種在培育過程中,控制毛色、毛產(chǎn)量和肌肉發(fā)育相關(guān)基因受到了強(qiáng)烈選擇。
1)深度挖掘湖羊萬羊基因組計(jì)劃數(shù)據(jù),鑒定出具有育種價(jià)值的優(yōu)異基因。
2)優(yōu)化基因分型技術(shù)與芯片位點(diǎn)分布,降低基因組選擇成本。
3)突破綿羊表型組高通量精準(zhǔn)測定技術(shù),加快混合品種萬羊基因組計(jì)劃進(jìn)程。
4)設(shè)計(jì)中國地方品種和引進(jìn)品種的DNA身份證,建立品種精準(zhǔn)鑒定技術(shù)體系。
5)推動(dòng)基因組育種技術(shù)在綿羊育種中應(yīng)用,建立商業(yè)化育種體系,培育突破性綿羊新品種和特色綿羊新品系。
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